Vergleich der verschiedenen Proteintests
Die allgemein üblichen Methoden für Proteintests sind:
1. ASTM D5712–95 und 99
2. RRIM, eine modifizierte Lowry-Methode
3. EN455 Teil 3–94 und 00
4. ISO/DIS 12243
Die entscheidenden Unterschiede der Methoden:
| # | Verfahren |
ASTM |
RRIM |
EN455 |
ISO |
| 1 | Extraktion | 1 Handschuh in kleine Stücke geschnitten (0,025 M, pH 7,4) bei 25° C für 2 Std. in PBS eingelegt | Kleine Stücke (0,01 M, pH 7,4) bei 23°C für 3 Std. in PBS eingelegt | 2 Handschuhe (ineinander gesteckt), TES (0,1 M, pH 7,4) bei 25°C für 2 Std. | Kleine Stücke (0,01 M, pH7,4) bei 25°C für 2 Std. in PBS eingelegt |
| 2 | Fällung
|
Verwendung von DOC 0,15%, TCA 72%, PTA 2% 0,35 – 1 ml von 0,20 M NaOH |
Verwendung von TCA 35% und PTA 1,6% 1-6 ml von 0,2 M NaOH |
Verwendung von DOC 0,15%, TCA 72%, PTA 72% 0,20-1 ml von 0,10 M NaOH |
Verwendung von DOC 0.15%, TCA 72%, PTA 72% 0,80-4,0 ml von 0,20 M NaOH |
| 3 | Lowry-Test |
Einsatz von basischem Kupfertartrat & Folin 50% 15 + 30 min Ovalbumin Lösung |
Einsatz von basischem Kupferzitrat & Folin 72% 10 + 30 min BSA-Lösungen |
Bio-Rad DC Protein-Testset 1 |
Basisches Kupferzitrat & Folin 72% 15 min Ovalbumin Lösung |
Key
PBS - Phosophatgepufferte Kochsalzlösung
TES - Heminatriumsalz, N-Tris-[Hydroxymethyl]-Methyl-2-Aminoethan-Sulfonsäure
TCA - Trichloressigsäure
PTA - Phosphorwolframsäure
DOC - Natriumdeoxycholat
NaOH - Natriumhydroxid
BSA - Bovinserum Albumin



