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Fon: (49)-7348-94995-0
Ulma International

Vergleich der verschiedenen Proteintests

Die allgemein üblichen Methoden für Proteintests sind:
1. ASTM D5712–95 und 99
2. RRIM, eine modifizierte Lowry-Methode
3. EN455 Teil 3–94 und 00
4. ISO/DIS 12243

Die entscheidenden Unterschiede der Methoden:

#
Verfahren
ASTM
RRIM
EN455
ISO
1 Extraktion 1 Handschuh in kleine Stücke geschnitten (0,025 M, pH 7,4) bei 25° C für 2 Std. in PBS eingelegt Kleine Stücke (0,01 M, pH 7,4) bei 23°C für 3 Std. in PBS eingelegt 2 Handschuhe (ineinander gesteckt), TES (0,1 M, pH 7,4) bei 25°C für 2 Std. Kleine Stücke (0,01 M, pH7,4) bei 25°C für 2 Std. in PBS eingelegt
2

Fällung



Erneute Lösung/
Konzentration

Verwendung von
DOC 0,15%,
TCA 72%,
PTA 2%

0,35 – 1 ml von 0,20 M NaOH
Verwendung von
TCA 35%
und PTA 1,6%


1-6 ml von 0,2 M
NaOH
Verwendung von
DOC 0,15%,
TCA 72%,
PTA 72%

0,20-1 ml von 0,10 M NaOH
Verwendung von DOC 0.15%,
TCA 72%,
PTA 72%

0,80-4,0 ml von 0,20 M NaOH
3

Lowry-Test




Farbentwicklung

Kalibrierungs-standard

Einsatz von basischem Kupfertartrat & Folin 50%


15 + 30 min


Ovalbumin Lösung
Einsatz von basischem
Kupferzitrat &
Folin 72%

10 + 30 min


BSA-Lösungen

Bio-Rad DC Protein-Testset 1



30 min


Ovalbumin Lösung

Basisches Kupferzitrat & Folin 72%


15 min


Ovalbumin Lösung

Key
PBS - Phosophatgepufferte Kochsalzlösung
TES - Heminatriumsalz, N-Tris-[Hydroxymethyl]-Methyl-2-Aminoethan-Sulfonsäure
TCA - Trichloressigsäure
PTA - Phosphorwolframsäure
DOC - Natriumdeoxycholat
NaOH - Natriumhydroxid
BSA - Bovinserum Albumin

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